Streptokokker er klassifisert i tre grupper basert på deres hemolytiske aktivitet på blodagar:
1. Alfa-hemolytiske streptokokker (α-hemolytiske) :Disse streptokokkene produserer en delvis hemolyse av røde blodlegemer, noe som resulterer i en grønnaktig misfarging av agaren rundt koloniene. Det grønnaktige pigmentet som produseres skyldes omdannelsen av hemoglobin til methemoglobin av enzymet NADH-avhengig hydrogenase. Enzymet reduserer NAD+ til NADH, som deretter reduserer methemoglobin, en oksidert form for hemoglobin, til hemoglobin. Denne enzymatiske reaksjonen fører til dannelsen av et grønnaktig pigment, som gir alfa-streptokokker deres karakteristiske "grønnende" effekt på blodagar.
2. Beta-hemolytiske streptokokker (β-hemolytiske) :Disse streptokokkene forårsaker fullstendig hemolyse av røde blodceller, noe som resulterer i en klar sone med fullstendig lysis som omgir koloniene på blodagar. Beta-hemolyse er forårsaket av produksjonen av potente hemolytiske toksiner, som streptolysin O og streptolysin S, som lyserer de røde blodcellemembranene.
3. Gamma-hemolytiske streptokokker (γ-hemolytiske) :Gamma-streptokokker forårsaker ingen hemolyse av røde blodlegemer. De produserer kolonier uten misfarging eller endring i den omkringliggende agaren.