Western Blot Detection Metoder

Som antall HIV- og AIDS- tilfeller steg over hele verden , behovet for nøyaktig HIV-testing ble avgjørende . Nå etter positive ELISA HIV-tester , medisinske fagfolk bruker en Western blot test for å bekrefte en positiv HIV-infeksjon . Legene diagnostisere Lyme sykdom gjennom Western blot testing også. Testen benytter intrikate påvisningsmetoder : helsearbeidere må overføre blodprøver fra en gel til en membran for å forenkle deteksjonsprosessen . For faktisk å identifisere antistoffer i membranen, arbeidere bruke spesifikke enzymer, substrater og /eller flurophores . AP Enzyme

alkalisk fosfatase ( AP ) utgjør en av de viktigste enzymer i Western blot testing. AP har en lineær reaksjonstid, noe som gir den en deteksjons fordel fremfor andre enzymer . Jo mer tid en AP reaksjon må skje , jo mer nøyaktig testen . Imidlertid kan det lengre periode plukke opp andre kjemiske forbindelser og "bakgrunn " støy , som kan forskyve resultatene av testen .
HRP Enzym arkiv

helsearbeidere anser pepperrot (HRP ) overlegen til AP , på grunn av HRP mindre størrelse , høy aktivitet hastighet , kompatibilitet med reaksjonen membran , pålitelighet , billig pris og utbredte tilgjengeligheten .

Kromogene substrater

Medisinske fagfolk vurdere kromogeniske underlag beste for å vise den indre - membran reaksjon av blod og enzym . Kromogene substrater er ikke så sensitiv som andre substrater og har en tendens til å forsvinne som blot tørker. Men for en rask visuell test bekreftelse , kromogene substrater lage et effektivt valg .
Chemiluminescent Blotting Underlag

Chemiluminescent blotting underlag krever en konstant reaksjon for en vellykket test . Dersom enzymaktivitetenopphører eller substratet er oppbrukt , blir testresultattapt. Imidlertid , i en optimal test , blir testresultattilgjengelig i en til 24 timer. Helsearbeidere bruker digital bildebehandling utstyr eller røntgen for å faktisk se testresultatet , fordi det blotte øyet ikke kan oppdage det .
Flurophores
p Hvis helsearbeidere ikke teste med enzymer og deres respektive underlag , da de benytter flurophore - konjugerte antistoffer . Den flurophore Testen krever færre trinn , men trenger spesialutstyr . Testen krever en eksitasjon lyskilden , noe som fører til den riktige reaksjonen i membranen . Flurophores og lysutstyr er dyre , men helsearbeidere har fordelen av å bruke flere flurophores i samme eksperiment .