Proteiner er en komponent i hver eneste celle i kroppen . Proteaser (også referert til som proteolytiske enzymer eller proteinaser ) er fordøyelsesenzymer som har som funksjon å bryte ned proteinene . I tillegg til fordøyelsen , proteaser er også avgjørende for blod - clotting , metabolsk kontroll og immunregulering. Under den biokjemiske prosessen ( katalyse ) , substrater bindes til enzymet aktive sete og blir omdannet til ett eller flere produkter som deretter frigis fra området. Denne prosessen kan bli utvidet eller hemmet for å øke eller redusere reaksjoner i kroppen , avhengig av ønsket resultat . Merking substrat produkter tillater forskere å måle dette enzymatisk aktivitet . Fluorescerende merking er en teknikk som brukes til å farge bestemte molekyler , noe som gjør dem lettere å spore . Ting du trenger
målmolekyl cocktail
fluorescerende fargestoff merking kit
fluorescens lesing instrument på
Vis flere instruksjoner
Hvordan Etikett Protease Wafere Products
en
Velg din fluorescerende fargestoff . Vanlige fargestoffer inkluderer rhodamin og fluorescein . Disse kan vanligvis kjøpes fra produsenter .
To
Kjør reaksjonen og fjerne ubrukte Fluoroforen fra målmolekyler ved hjelp av størrelse utelukkelse kromatografi ( en prosess som skiller molekyler basert på deres størrelse ) . Dye fjerning Kolonner er også ofte brukt . Disse er ofte annonsert med merking kits .
3
Detect molekylene . Bruk en fluorescens leseinstrument, for eksempel et fluorescens mikroskop. Lys av en bestemt bølgelengde er gått gjennom molekyl ( indirekte for noen teknikker ) , belyse fluoroforen .
4
Ta dine målinger . Fordi assays måle enten hvor mye substratet ble forbrukt eller mengden av produktet frigjøres over et tidsrom, kan enzymmengdermåles i mol (fysisk kvantitet) eller enzymenhetene ( aktivitet) .
