OptiPrep Gradient Forberedelse Protokoller

OptiPrep er det kommersielle navnet på en steril endotoksin løsning av 60 prosent iodixanol , en kjemisk opprinnelig utviklet som en X - ray kontrastmiddel . Endotoksiner er strukturelle molekyler av bakterier, som kan bli gjenkjent av kroppens immunsystem . Norsk laboratorie Axis -Shield produserer denne løsning, som er mye brukt i biomedisinsk forskning , inkludert cellemembran-trafikk av stoffer , så vel som virus-og bakterie genetikk. Natriumklorid Protocol

Den generelle formål OptiPrep natriumklorid gradient forberedelse ved hjelp av natriumklorid som osmotisk balanserer , som holder løsningens konsentrasjon balansert. Teknikere gjør en 50 prosent iodixanol fungerende løsning ved å fortynne OptiPrep med en standard fortynningsmiddel . De legger til 0,85 prosent natrium klor eller 0,25 Molar sukrose og Tris - hidrochloride ved pH 7,4 til gradient forberedelse. Ifølge Axis- Shield, er makromolekyler tradisjonelt blitt renset i gradienter inneholdende høye konsentrasjoner av sukrose , glycerol , alkalimetallsalter eller tungmetallsalter . OptiPrep tilbyr alternativ å isolere dem under mindre konsentrerte løsninger .
Protokoll for HPV Study

HPV , eller human papilloma virus , angriper slimhinnene , forårsaker kjønnsvorter og sår som kan utvikle seg til svulster . Den OptiPrep protokollen gjelder studiet av virusets genetisk materiale , og omfatter gradient fremstilling av OptiPre . Teknikere forberede en 46 prosent gradient OptiPrep preparat ved å blande 70 ml av den OptiPrep , 10 ml fosfatbufret saltvann ( PBS) , 12,5 ml av natrium klor , 45 mikroliter av kalsiumklorid , 25 mikroliter av magnesium -klorid og 210 mikroliter av kaliumklorid . Preparatet må beskyttes mot lys og oppbevares ved romtemperatur i opptil to måneder .
Isolering av dendrittiske celler Protocol

dendrittiske celler er en del av immunsystemet hos pattedyr , som ofte er tilstede i vev i nærheten av huden og i den indre foring av enkelte organer , slik som i magesekken og tarmene. Den dendrittiske celler protokollen bruker OptiPrep løsning i ferd med å isolere disse cellene. Teknikere bland OptiPrep i ​​en løsning av åtte prosent natriumklorid, Tricine -buffer ved pH 7,4 , og etylendiamintetraeddiksyre ( EDTA) . Stigningen forberedelse kan oppbevares i opptil 39,2 grader Fahrenheit for en måned .