Confocal scanning mikroskopi brukes av forskere i biologisk vitenskap og andre næringer for å få et bilde av de tre- dimensjonale arkitektur av et eksemplar , for eksempel en celle eller vev . Dessuten er fremgangsmåten som brukes for å observere den mikroskopiske struktur av en prøve som av en eller annen grunn ikke kan bli skåret i seksjoner på forhånd. Selv om disse utfordringene kan møtes ved hjelp av en kompleks databasert bildebehandlingsprogram , er denne metoden treg og krever mye datakraft .
Konfokalmikroskopi vs Standard Lett Mikros
p Hvis en tykk prøven er sett med en konvensjonell lysmikroskop , blir bildet oppnås ved å fokusere på en bestemt plan forverret av uklare , ute av fokus avlesninger som kommer fra de delene av prøven ligge over og under planet av fokus. For vanlige lysmikroskopi for å fungere godt, må en prøve bli oppskåret i tynne seksjoner som skal analyseres , og tykkelsen seksjonens er omvendt proporsjonal med bildets klarhet. Men muligens verdifull informasjon om den tredje dimensjonen er tapt når en prøve seksjonert og , som nevnt , noen prøver kan ikke bli seksjonert lett i det hele tatt .
Hvordan det fungerer
confocal scanning mikroskop fokuserer på en spesifikk plan i en tykk prøve mens avvise lyset som kommer fra ut-av - fokus områder over og under det flyet . Dette resulterer i en ren " optisk del," og fra en sekvens av disse seksjoner er tatt ved forskjellige dybder , kan et dataprogram rekonstruere et tredimensjonalt bilde. Denne strategien er nokså likt det en CAT -skanner gjør for radiologer undersøker en hel menneskekropp , som begge metodene som finnes rene snitt viser en intakt struktur interiør
Hvordan det virker : . Detaljene
enheten er vanligvis brukes med fluorescens optikk , og til enhver instant maskinens optiske systemet fokuserer sitt søkelys på ett enkelt punkt på en viss dybde i utvalget . En svært lyse kilde presisere belysning er nødvendig, og dette er vanligvis gitt av en laser hvis lys ledes gjennom et pinhole . En detektor utstyrt med et pinhole apertur samler fluorescensen som avgis fra den belyste prøve. Bare lyset fra den spesifikke fokuspunktet kommer inn i detektoren , og enheten utelukker lyset som kommer fra områder utenfor fokusplanet .
Spesifikke bruksområder
confocal skanning mikroskop er ofte brukt for å løse strukturen av ulike komplekse tredimensjonale objekter, for eksempel nettverk av cytoskeletal fibrene i cytoplasma av celler , og arrangementer av kromosomer og gener i en celle kjernen under ulike punkter i celledeling syklus. Pollenkorn , for eksempel , har en kompleks skulpturert cellevegg , som bare kan sees tydelig ved hjelp konfokalmikroskopi . Elektronikkindustrien bruker også denne maskinen og metodikk for å inspisere halvledere .