Co- immunoprecipitation Protocol

Co- immunoprecipitation protokollen (Co - IP ) er en mye brukt fremgangsmåte for å analysere protein interaksjon . Fremgangsmåten er generelt sammensatt av tre trinn. Et antistoff som er innført i et cellelysat , blir antistoff - protein -komplekset er kjemisk bundet , og proteinet er identifisert ved analyse. Co- Immunoutfelling Oppsummering

Co- IP består av en rekke tiltak for å sikre nøyaktige testresultater . Det første trinnet krever et antistoff som er spesifikke for proteinet som skal tilsettes . I det andre trinnet , protein -G -eller protein -A- sefarose anvendes for å binde antistoff - protein -komplekset . Til slutt , sekvense et renset protein band, eller Western blot analyse , blir brukt til å identifisere co - utfelt protein .
Generelle Steps

Protokollen kan deles inn tre hovedsteg på sikt av mekanikken i prosessen . Det første trinnet er arbeidsflyt for å fullføre prosedyren i minst mulig tid . Det andre trinnet er generelle betraktninger for prosedyren . Det siste trinnet er feilsøking .
Spesifikke trinn

arbeidsflyt begynner med å forberede kulturen for blotting analyse og konkluderer med fastsettelse av tilstedeværelsen av noen proteiner. Generelle betraktninger består av nøkkeltrinnene som for eksempel pre- rensing , valg av buffere og valg av Protein A -eller Protein G- Resin . Feilsøking avtaler med slike spørsmål uten påvisning av protein, binding av antistoffer mot proteiner, antistoffragmenter og muligheten for et mislykket Co- IP .