Hvordan måle Protein Expression

Protein uttrykket tiltaket kan gi hint om aktivitetene til genene i kroppen din , fordi proteinene fungerer som den endelige katalysator av celler aktiviteter . Men ifølge en artikkel i mars 2010 utgaven av " LabMedicine ", patologer og biologer er ennå å bli enige om lysfelt mikroskopi eller fluorescens mikroskopi som den mest egnede metoden for å måle protein uttrykk . Whole -slide lysfelt skanning er ikke bare lett å bruke og gir kromogenløsningen stabilitet , men det kan beskytte glass lenger . Du trenger en Cell vev
Slide
Biotinylated sekundært antistoff
Streptavidin - pepperrotperoksidasesett
3,3 ' - Diaminobenzidine
Color line- scan kamera
Vis flere instruksjoner
en

Plasser cellevev på en sklie og legge en biotinylated sekundært antistoff , etterfulgt av en streptavidin - pepperrot peroksidase og vente i to minutter .
to

hell fire dråper av 3,3 ' - diaminobenzidin på prøven og vente i to minutter for den brune flekken for å spre helt på prøven .
3

Plasser en histologisk seksjon av farget prøven på en motorisert plattform i et godt opplyst rom . Justere nøye Color Line -scan kamera til 20X eller 40X forstørrelse og skanne prøven . Rett inn striper i bildet og komprimere digitale bildet til en lesbar fil størrelse .
4

Skriv ut det digitale bildet for manuell analyse eller mate bildet inn dataprogram for teknologi assistert analyse . Observer mønster av flekker som presenteres i bildet . Analysere nøye protein uttrykk basert på mønstre av flekker på prøven .
5

Vurdere protein uttrykk på kreftceller og stroma ved å undersøke konsentrasjonen av protein uttrykt på cellevevet.

6

Bruk fargemønstreå kvantifisere protein uttrykk i en skala fra 0 til 3 +. Bruk score for å beregne HER- score eller Allred poengsum .