Hvordan Block Buffer

Blokk buffere brukes til å stabilisere proteiner i belagte Immunokjemiske analyser og ifølge Immunokjemiske Technologies , redusere de støy i resultatene av de enkelte analyser, øke sensitiviteten til analysen , øke effektiviteten og holdbarheten av de belagte plater og forbedre reproduserbarhet . Blokk buffere inhibere ikke-spesifikk binding når proteiner og antistoffer er bundet sammen og er blitt absorbert på den belagte assay -plate under en ELISA ( en enzym-bundet immunosorbent analyse) . Fordi ELISAs kan bygges på forskjellige måter , er det flere valg for å blokkere buffere til å møte en tekniker individuelle behov . Du trenger
Antistoff prøven
Protein prøven
analysen plate
Blokkering buffer
Laboratorie begre
Pipette på
Vis flere Instruksjoner
en

Velg din blokkerer buffer avhengig av hvilken type ELISA du skal utføre . Valg av buffer inkluderer : generelle blokkere ( pattedyr protein stillaset ) for sandwich- og antigen - ned ELISAs; BB2 neptune blokkering ( ikke- pattedyr protein stillas ) for menneske-og pattedyrarter ELISAs; BB3 synblocks (små, syntetiske molekylære stillasene ) for høy styrke blokkerer ELISAs; og BB4 fosfat -fri (små, syntetiske , fosfor -fri molekylære stillasene ) for høy , ikke- spesifikk enzym - merket konjugat bindende ELISAs . Den BB4 buffer blocker er spesielt nyttig i analyser som bruker alkalisk fosfatase , kjemisk behandlet eller glass reaksjonsplaterog i MicroFluidics , som rapportert av immunokjemisystemer Technologies , et selskap som leverer alle relevante analyseutstyr.
To

Coat analysen plate med antigen ( protein ) eller antistoff ved å helle løsningen på tvers av platene .
3

Sug ( fjern) belegget løsning ved å vippe plate så overflødig forkastes inn i en egen beholder .
4

pipette 300-400 mikroliter av blokkeringsbufferi hver brønn av analysen platen med en pipette .
5

Inkuber løsninger for rundt tre timer eller over natten ved normale temperaturer ( 4 grader Celsius) . Ifølge Cell Technology selskapet, vil den rette blokken buffer bevare dine reagenser , noe som kan være verdifulle fordi de er kostbare og kan være en mangelvare .
6

Vask overflødig protein for å fjerne overskytende beløp som dette kan redusere påvisning av målet antigen , som rapportert av Pierce Net .
7

på dette punktet , er reaksjonen fullført og du bør ha en ferdig plate som inneholder riktig mengde antistoff bundet til antigen , noe som vil gi konsistente resultater og redusere plate - til-plate- variasjon i store, sammenlignende analyser.
8

i tilfelle av en microarray , bruke en avansert blokkeringsløsningslik som Array det er Block det Buffer som har blitt designet spesielt for å inaktivere eventuelle reaktive grupper som gjenstår etter en " print" av underlag på lysbilder som inneholder super - epoxy , super - amin og super - aldehyd samtidig beholde skarpheten resulterende signal , hindrer fluorescens og tilrettelegging støyreduksjon . Denne reagensen har en holdbarhet på ett år hvis riktig lagret , er svært ren , og er gitt som en klar - til - bruk konsentrat .