Mens AI kan utføres når som helst i brunstsyklusen, er det mest effektivt når det gjøres på det optimale tidspunktet for befruktning. Brunstsyklusen hos hunder består vanligvis av fire stadier:proestrus, estrus, diestrus og anestrus. Brunststadiet er perioden da hunnhunden er fruktbar og mottakelig for parring. AI er mest vellykket når den utføres under sen proestrus eller tidlig brunststadium, som vanligvis er 2-3 dager etter begynnelsen av merkbare tegn på brunst.
For å bestemme den optimale tiden for AI, vurderes flere faktorer, inkludert den enkelte hunds brunstsyklushistorie, progesteronnivåer og atferdstegn på mottakelighet. Veterinærfagfolk, spesielt de som har erfaring med reproduksjon av hunder, kan hjelpe til med å overvåke brunstsyklusen og bestemme den ideelle tiden for AI for å maksimere sjansene for vellykket befruktning.
Det er viktig å merke seg at AI ikke bør utføres når som helst under brunstsyklusen uten riktig planlegging og konsultasjon med en veterinær. Feil timing av AI kan føre til mislykket avl eller uønskede graviditeter. I tillegg bør AI utføres ved bruk av passende teknikker og sterilt utstyr for å minimere risikoen for infeksjoner eller andre komplikasjoner.