Slik utfører en Allium Cepa Test

Løk ( Allium cepa) er brukt for å vurdere miljøfarer ved at utviklings røtter å komme i kontakt med stoffer som skal testes . Etter tilstrekkelig eksponering, blir rottene tatt av, farget og oppmalt , slik at cellekromosomerkan sees under et lysmikroskop . Toksisitet er dokumentert om kromosomfeil eller celledeling unormalt oppdages . Root tips brukes fordi cellene der er aktivt voksende og dele , noe som gir en god sjanse til å se kromosomer under ulike stadier av celledeling . Du trenger
Løk arkiv Knife
Vann
Begre eller andre beholdere for å holde væsker og løk
Test væsker arkiv Barberblad eller skalpell
Ampuller arkiv Aceto - alkohol fiksativ
Objektglass
Cover glipper
Saltsyre
Rustfritt stål macerating stang
Carbol fuksin flekken
Aceto - orcein flekken
Eddiksyre
Canada balsam
lysmikroskop
Kamera vedlegg for mikroskop på
Vis flere instruksjoner
Sette opp Test
en

Fjern den ytre tørr hud av 12 løk . Skrape bunnen av løken rundt bunnplater uten å skade det området som røttene vil dukke opp .
To

Velg begre som har en munn bred nok til å holde bunnen av løk nedsenket i test væsker . Fyll begre med destillert vann og legg løken i begrene i kontakt med vannet . Skjerme sidene av begre med aluminiumsfolie for å simulere jordiske mørke . Bytt vann daglig .
3

Undersøke løk baser etter to dager . Roots burde ha dannet . Evaluer rotvekst og kast de to lok med den svakeste rotvekst .
4

Sett opp en andre serie på fem begerglass som hver inneholdt en prøve av det materiale som skal testes , slik som avfallsvann eller industrielt avrenning . Sett fem av løken i disse begre . Beholde de andre fem i destillert vann som testkontroll . La røttene å vokse i ytterligere 24 timer .
Forbereder arkiv de Roots
5

Med en skalpell eller barberblad , høste fem-seks rotspissene fra hver løk , innspilling som var kontrollene og som var forsøkspersoner . Hold røtter fra individuelle løk skille i små merket ampuller .
6

Fix rotspissene umiddelbart i Aceto - alkohol i en 1:03 ratio . Plasser rotspissene for en løk på et objektglass og oppbløtes dem i 1 N saltsyre , noe som er det samme som 1 molar saltsyre , ved 60 grader Celsius i tre minutter. Stain macerated tips med Carbol fuchsin flekken , en blanding av fenol og grunnleggende fuchsin som binder seg til elementer i celleveggene slik at de blir mer synlig under lysmikroskopi .
7

Legg to prosent aceto - orcein flekken i fire prosent eddiksyre. Dette farger kromosomene . Rør med macerating stang . Påfør et dekkglass , trykke den ned for å ta knekken på de grunn tips . Enten forsegle kantene med hurtigtørkende neglelakk eller permanent montere forberedelsene i Canada balsam , harpiks fra balsam edelgran blandet med enten essensielle oljer eller xylen . Antall lysbildene slik at resultatene vil bli registrert , men ikke klart hvorvidt hver er en prøvekanin eller en kontroll .
Opptaksresultat
8

Plasser objektglass på scenen av et lysmikroskop . Undersøke feltet under lavere forstørrelse , bytte til høyere forstørrelse for å undersøke kromosomene .
9

Noter kromosomavvik på et datablad , registrering av informasjon ved kodet nummer for hver løk . Inkluder ufullstendig separert eller ødelagte kromosomer , mikrokjerner ( ekstra kjerner dannes nær slutten av celledeling som kan inneholde kromosom rusk ) , kromosom ringer og klissete og forstyrret kromosomer i ulike stadier av celledeling . Fotografere hvert lysbilde .
10

analysere dataene ved hjelp av statistisk analyse . Tolke resultatene for å vurdere hvorvidt testen løsningen er gentoksisk .