Essensielle strømningscytometri Metoder

Strømningscytometri innebærer prinsippet for hydrodynamisk fokusering , ved hjelp av en lett magnetisering kilde slik som en laser, for å måle og analysere de fysiske egenskapene til de enkelte partikler. Strømningscytometri er hovedsakelig anvendt til celle -analyse , og egenskapene analysert inkluderer cellestørrelse , kornethet og fluorescens- intensitet. Essential deteksjonsmetoder som brukes i flowcytometri inneholde spredt lys , side spredt lys og fluorescens . Flowcytometer

et flowcytometer er utgjør av lufthåndtering , optikk og en elektronikksystem. Den lufthåndtering systemet er ansvarlig for transport av prøven stream til laserstrålenfor avhør . Optikken Systemet inneholder lasere og optiske filtre som belyser prøver og direkte lys signaler til de aktuelle detektorer . Dette oppdaget lyset omdannes til elektroniske signaler ved det elektroniske systemet , for tolkning av datamaskinen .
Forward - spredt lys

diffraktert lys som spres i en retning fremover blir oppdaget omtrent 20 grader av aksen fra laserstrålen av en fotodiode som kalles foroverspredtkanal (FSC) . Frem - spredt lys er direkte proporsjonal med partikkeloverflateareal, og brukes som en indikator på cellestørrelse og til å skille mellom levende og døde celler. På grunn av disse egenskapene , er FSC påføres immunophenotyping som en utløser for signalbehandling .
Side Spredt Lett

Side- spredt lys refererer til lyset brytes på en hvilken som helst celle grensesnitt, som er målt ved omtrent 90 ° i forhold til laserstråleaksen med side- spredningskanal( SSC ) , og deretter videresendt til den relevante detektor av en strålespalter . Side- spredt lys er omtrent ekvivalent med celle granularitet eller intern kompleksitet, og blir brukt til å bestemme den granulære innhold av celler. Side og fremtids spredt lys brukes i kombinasjon for å skille mellom ulike celletyper .
Fluorescens

fluorescens gir både kvantitativ og kvalitativ informasjon om intracellulære molekyler som cytokiner og DNA , og celleoverflatereseptorer , ved hjelp fluorokromkonjugerte etiketter og måler ved forskjellige bølgelengder . Hver fluorokrom etiketten har en bestemt bølgelengde rang ved hvilken lyset blir absorbert kalt absorpsjonsspektrum . Fluorescens fungerer som et foton av lys slippes ut av en begeistret elektron påfølgende til lys absorpsjon .