Molisch-testen brukes til å oppdage tilstedeværelsen av karbohydrater i et stoff. Den er basert på dehydrering av karbohydrater for å danne furfural eller hydroksymetylfurfural i nærvær av konsentrert svovelsyre. Disse forbindelsene reagerer deretter med α-naftol for å produsere en lilla eller fiolett farge.
Trinn-for-trinn prosedyre:
1. Eksempelforberedelse: Ta en liten mengde av stoffet som skal testes i et reagensrør. Hvis prøven er fast, oppløs eller suspender den i et lite volum vann.
2. Tilsetning av α-naftol: Tilsett noen dråper α-naftolløsning (1 % i etanol) i reagensrøret.
3. Konsentrert svovelsyre: Tilsett forsiktig konsentrert svovelsyre (H2SO4) langs sidene av reagensrøret, slik at det danner et eget lag under prøveløsningen. Ikke bland de to lagene.
4. Observasjon: Observer reaksjonssonen der de to lagene møtes. Hvis karbohydrater er tilstede, vil en lilla eller fiolett farge utvikles ved grensesnittet.
Kjemiske reaksjoner:
1. Dehydrering av karbohydrater:Den konsentrerte svovelsyren dehydrerer karbohydratene, og omdanner dem til furfural eller hydroksymetylfurfural.
2. Reaksjon med α-naftol:Furfural eller hydroksymetylfurfural produsert i trinn 1 reagerer med α-naftol i nærvær av svovelsyre for å danne en lilla eller fiolettfarget forbindelse. Dette fargede produktet er kjent som Molischs kromogen.
Tolkning av resultater:
- Positivt resultat:Dannelsen av en lilla eller fiolett farge ved grensesnittet indikerer tilstedeværelsen av karbohydrater i stoffet.
- Negativt resultat:Hvis ingen fargeendring observeres, tyder det på fravær av karbohydrater eller konsentrasjonen av karbohydrater er under testens påvisbare grense.
Molisch-testen er en foreløpig test for å påvise tilstedeværelse av karbohydrater og brukes ofte som en screeningtest før man går videre med mer spesifikke tester for ulike typer karbohydrater.