DNA-ekstraksjon Prosedyrer

DNA er oppskriften for livet; innenfor sine milliarder av koder legge grunnlaget for organismer . Studier og analyser av DNA - i alt fra slektsforskning til kriminelle etterforskninger - har blitt svært vanlig . For å undersøke DNA , men det må først hentes ut fra en prøve . Enten det er en hårlokk eller en bit av blod , kan DNA finnes i nesten alt som utgjør en organisme og dens utvinning prosedyrer har blitt perfeksjonert over flere tiår .
cellelyse

Lysis er handlingen der cellene er bokstavelig talt ødelagt, forårsaker deres innhold for å søle ut for analyse . De celler som inneholder DNA-prøven som skal ekstraheres må åpnes , og dermed tillater oss å få tilgang til lysatet , eller fluidet på innsiden . Dette oppnås ved flere metoder , den mest vanlige av disse er sonicating . Sonicating er den prosessen som kondenseres lyden tilføres til cellene , og dermed å røre dem , og å bryte sine intermolekylære reaksjoner. Andre metoder for å indusere lyse inkluderer innføre et virus , som bryter den åpne fra innsiden; enzymer som spiser bort på overflaten; og osmose , som innebærer å plassere cellene i vannet , slik at væsken på innsiden av dem å gjøre sin bort på utsiden , der det kan utvinnes .
Membran fjerning

Deretter lipidene over hele cellens membran må fjernes. Lipider er typer fett , voks , monoglyserider , fosfolipider og andre naturlig forekommende molekylære stoffer som brukes som strukturelle komponenter til cellemembraner, noe som gir dem litt stivhet . Disse fjernes ved å vaske cellenes lysatet i såpevann , vanligvis en form for kromsyre .
Protein fjerning

Etter lipidene har blitt fjernet fra lysatet , er det nå viktig å fjerne eventuelle gjenværende proteiner . Dette oppnås gjennom tilførsel av det som kalles en protease . En protease er et enzym som spesielt er utformet for å bryte ned de angitte proteiner. Denne handlingen kalles proteolyse , mens protease fører hydrolyse ( bryte ned ) av de båndene som holder aminosyrer sammen . Aminosyrer utgjør proteiner , og uten deres konfigurasjon , bryter proteinet ned .
Utløsende
p Det er endelig tid for å se den rene DNA . Dette kan gjøres ved å dyppe lysatet i is- kald alkohol , vanligvis etanol. Siden DNA er uoppløselig i alkohol , det vil klumpe seg sammen . Når blandingen er omrørt med en metallskje , vil DNA synlig vikle rundt metallet , likner hvit bomull . Dette er kjent som utløsende , med DNA som kalles DNA utfelling .
Isopropanol

Sammen med etanol , isopropanol også brukes noen ganger trenger å trekke ut DNA utfelling . På den positive siden , er det mer effektivt enn etanol, noe som gir en høyere konsentrasjon av DNA ved bruk. Men det er også langt mindre flyktig og krever mer tid for å tørke. Det kan også bemerkes at DNA ikke kan følge , så vel på skjeen eller rør ved bruk av isopropanol .