Protokoll for transfeksjon av GFP

Bruken av grønt fluorescerende protein revolusjon molekylær-og cellebiologi, det tillot forskerne å visualisere celler og proteiner på måter som aldri før har vært mulig . Dens innvirkning på vitenskapelig forskning var så dyp at i 2008 Osamu Shimomura vant Nobelprisen i kjemi for sin oppdagelse og isolering av GFP fra fluorescerende maneter . Definisjoner

Et gen er en sekvens av deoksyribonukleinsyre i celler som er ansvarlig for produksjon av et spesifikt protein. Et plasmid er et separat stykke av DNA som inneholder genet av interesse som GFP . Transfeksjon er metoden for innføring av et plasmid inn i cellene.
Metoder

Transfeksjon innebærer vanligvis blanding av et DNA- plasmid som inneholder et gen som GFP med lipider eller salter. Celler ble utsatt for denne løsningen , noe som skaper hull i cellemembranen , noe som gir plasmidet inn i cellen , hvor genet kan uttrykkes som protein. Kommersielle transfeksjon Pakkene er tilgjengelig, eller reagensene kan gjøres i et laboratorium. Valget av transfeksjon metoden er avhengig av type av celler og plasmider som er i bruk. GFP er visualisert og overvåkes med utstyr som registrerer fluorescens .
Bruker

GFP er vanligvis knyttet til et protein av interesse for transfeksjon . Nobelkomiteen blinket ut sporing av " nervecelleskadeunder Alzheimers sykdom" og " hvordan insulinproduserende betaceller er skapt i bukspyttkjertelen av en voksende embryo " som eksempler .