Hva er hensikten med syrefast Farging

In mikrobiologi , farging en bakterie betyr å farge det med et fargestoff for å se det mer tydelig under et mikroskop . Hvis bakteriene ikke er farget , synes de er klar og fargeløs , og det er vanskelig å se sine figurer . Bortsett fra sine former, hvor lett en bakterier er farget av visse flekker - hvis i det hele tatt - ofte gir en ledetråd for å identifisere bakteriene . Syrefast farging er en type av flekker som er effektive på enkelte bakterier som ikke kan bli farget av andre metoder. Differential Farging

å farge en normal bakterie , er flytende beis påføres raset i omtrent ett minutt , deretter skylles av med vann . Differensial farging bruker forskjellige flekker for to forskjellige bakterier i samme lysbilde . For eksempel, i en Gramfarging , lysbildet første farget med krystallfiolett og jod , og deretter avfarget med alkohol. Celler som er Gram -positive beholder mørk purpurfarge på den første flekk selv etter at alkohol er i bruk, mens Gram - negative celler vil vende tilbake til farveløst . Deretter en andre beis påføres , i en kontrastfarge som rosa , og de ​​Gram - negative celler vil bli rosa , mens de Gram - positive cellene vil holde sin opprinnelige flekken .
Historie

Noen bakterier har tykke cellevegger består av lipider , byggesteinene i fett , noe som gjør dem voksaktig og nesten vanntett . Dette betyr at en normal flekken ikke kan trenge inn i cellen . I 1880-årene , ble forskerne prøver å studere Mycobacterium tuberculosis , bakterien som forårsaker tuberkulose . Men det ville ikke holde en vanlig Gram flekken med mindre det var oppslukt av flekken i opptil 24 timer . Paul Ehrlich , som senere utviklet det første stoffet effektivt mot syfilis , utviklet syrefaste flekker å tvinge flekken inn i bakteriene . Ehrlich metode tok bare 45 minutter , mens moderne syrefaste flekker teknikk tar bare 5 minutter .
Metode

å tvinge fargestoff , vanligvis Carbol - fuchsin , inn i bakterier , må den være oppvarmet over et begerglass med kokende vann i 5 minutter , mens dekselet er konstant fylt med beis og ikke tillates å tørke ut. En alternativ metode for å varme er å bruke modifisert Kinyoun Carbol fuksin beis, som ikke trenger å være oppvarmet , men det er viktig at sleiden ikke tørke ut i løpet av 5 minutter nedsenking i flekken . Uansett hvilken primærfargemetodener brukt , er lysbildet avfarves med syre alkohol - ikke vanlig alkohol - og farget med en sekundær counterstain av en annen farge for å vise de andre bakterier som kan være til stede . Bakterier hvis primære flekker igjen etter decolorizing med syre alkohol kalles syrefaste .
Organism forholdsregler

Mycobacterium tuberculosis er ekstremt farlig , og er kun undersøkt på sykehus og klinisk anlegg som har separate rom eller spesialbygd overføringshetterfor å hindre forurensning . Det er ulovlig å bruke det i en akademisk laboratorium . I stedet er Mycobacterium smegmatis brukt , men den har en mye tynnere cellevegg enn M. tuberculosis , slik at det er lettere å tilfeldigvis over- decolorize raset og fjerne primær flekken .
Prosedyreforholdsregel

Carbol - fuchsin røyk er giftig, så når varme dem , bruke en avtrekkshette for å inneholde de røyk og lufte dem utenfor . Også for å unngå farene ved oppvarming glir helt, Kinyoun Carbol fuchsin kan brukes i stedet , som har en høyere konsentrasjon av fenol og fuchsin , to aktive ingredienser i flekken, og ikke trenger å bli oppvarmet for å trenge inn i bakterier.