Beskrivelse av en Tuberkulose Gram Stain

Tuberkulose er en smittsom sykdom forårsaket av Mycobacterium tuberculosis . Tuberkulose er en luftveissykdompreget av formasjoner av tubercules , nekrose , abscesser , fibrose og forkalkning i lungene . Det kan også infisere nyrene , lymfeknuter, bein , ledd og skin.Primary laboratorium diagnostisering av Mycobacterium tuberculosis innebærer flekker å visualisere bakterier under mikroskopet . Prøven av valget er sputum eller bronchoalveolar kylling for å identifisere en luftveisinfeksjon eller en faktisk vevsprøve . Fysiologi

Mycobacterium tuberculosis er en stavformet ( basiller ) , ikke-bevegelige , ikke- sporing , obligate aerobe . De måler 0.4x3 mikrometer i lengden . Mycobacterium tuberculosis undergår binær fisjon ( reproduktive celledeling ) hver 15 til 24 timer, som er langsom i forhold til andre bakterier. På grunn av dette , kan mycobacterium ta opp til ni uker for å vises på kulturmedia .

Mycobacterium tuberculosis er følsomme for UV-lys og varme (for eksempel pasteurisering ), men resistent mot kjemiske desinfeksjonsmidler .

gram Stain

Mycobacterium tuberculosis kan ikke virkelig bli klassifisert som gram positive eller gram negative . Den gram klassifiseringen er basert på mengden av peptidoglykan i bakteriens cellevegg . Et gram positiv bakterie som har et tykt lag av peptidoglykan (ca. 90 prosent ), mens en gram- negativ bakterie som har et tynt lag av peptidoglykan ( 5 til 20 prosent). De gram fargestoffer trenge inn i celleveggen og binder seg med de kjemiske komponenter i celleveggen . De fargede bakterier vil dukke lilla eller rosa under mikroskopet .

Med Mycobacterium tuberculosis , er celleveggen består av peptidoglycan men også komplekse lipider, som hemmer gram fargestoff penetrasjon . Det cellevegg motstår også bleiking med syre eller alkohol, slik at den mycobacterium er betegnet " syre -fast ». Det cellevegg- lipider er mykolinsyre , ledningen faktor og voks -D. Hvis bakteriene var å være farget , ville de bakterielle celler vises svakt gram- positive eller blek med svært lite farge .

Å visual bakterier , må spesielle flekker som Aumarine flekken eller Zhiel - Neelson flekken være utført .
Auramine - rhodamine flekken

Auramine - rodamin prosessen bruker en gul fluoriserende fargestoff å visualisere Mycobacterium tuberculosis under et fluorescens mikroskop . Kaliumpermanganat -eller akridin orange kan brukes som en counterstain . Under linsen , vil de bakterieceller vises grønt .

Auramine - rhodamine flekken er mer følsom enn den Zhiel - Neelson og mer kostnadseffektivt .
Ziehl - Neelson flekken

Ziehl - Neelson flekken stammer fra forskere Franz Ziehl og Friedrich Neelsen . Den bruker oppvarmet Carbol fuschin , høy konsentrasjon syre - alkohol og en counterstain som malakittgrønt eller metylenblått . Under en fluorescens mikroskop , vil de bakterieceller vises lyse rosa .

Ziehl - Neelson er gullstandarden for primær identifikasjon av Mycobacterium tuberculosis og Mycobacterium leprae .
Agar

Sekundær til mikroskopi identifikasjon , må Mycobacterium tuberculosis dyrkes på spesielle kultur agar . Lowenstein - Jensen agar har komplekse organiske stoffer ( f.eks egg , potet ) , salter , glyserol og malakitt grønt ( hemmer andre bakterier ) . Antibiotika kan tilsettes for ytterligere å hindre forurensende bakterier . Prøven plasseres på denne agar , og bakteriene vokse i 3-9 uker.

En kultur løsning av næringsstoffer som for eksempel albumin og biotin kan bli benyttet for å understøtte veksten av selv den minste mengde av mål- bakterier . Dette er kjent som Middle 7H9 ( eller 7H12 ) medium .

Koloniene vil vises som små , ​​polert , lys brune kolonier på begge.

Med avansert teknologi , kan Mycobacterium tuberculosis nå dyrkes ved hjelp en automatisert leseren . En flytende løsning av Middlebrook 7H9 medium og et fluorescerende indikator sammensatte brukes til å overvåke vekst og rapportere positiv eller negativ infeksjon .