Western Blot analyse

enten naturlig eller kunstig uttrykte proteiner blir nesten aldri alene. Western blot -analyse , eller immunoblotting , blir brukt til å isolere og analysere et protein av interesse fra en blanding . Prosedyre
Anvendelsen av spenning trekker proteiner gjennom en polymer gel på ulike priser .

Western blotting består av tre hovedtrinn : elektroforese , der proteinblandingen er delt inn i lokaliserte band basert på størrelse og kostnad ; overføre , hvor proteinene blir beveget fra en polymer gel på et papir -substrat ; og utvikling , der protein band av interesse er merket og analysert .
applikasjoner i forskning
En Western blot kan bidra til å bestemme celletype .

Western blotting er mye brukt i biomedisinsk forskning . Fordi proteiner er viktige indikatorer på cellefunksjon , kan en Western blot gi informasjon om cellenes stoffskifte og avstamning . Rekombinant protein uttrykk kan også verifiseres og studert ved hjelp av en Western blot .

Anvendelser innen medisin
En Western blot kan hjelpe i diagnosen av noen prionsykdommer .

Western blots er arbeidskrevende og tidskrevende , og deres kliniske anvendelser er således begrenset. Men de er viktige i å diagnostisere enkelte sykdommer , inkludert Lyme sykdom , HIV og prionsykdommer som Creutzfeldt -Jakobs sykdom .
Historie
Fordi polymer gel er ikke et godt underlag for immunokjemien effektiv overføring var et viktig fremskritt .

Den første demonstrasjonen av protein separasjon i en polymer gel ble publisert i 1977 . Den raske og effektiv overføring av proteinet til papir ved electroblotting - kritisk for metoden ' s aksept - ble demonstrert i 1979
Naming
Pr. 2010 . , var det ingen Eastern blot .

Begrepet “ Western blot ” er en del av en noe forseggjort forskere ' ordspill . Den tilsvarende fremgangsmåte for å karakterisere DNA , kalles en Southern blot etter sin oppfinner , George Southern . Den RNA -versjonen er universelt kjent som en Northern blot og , kanskje uunngåelig , er protein immunoblotting Western blotting .