Hva er Actin Antistoffer

? Actin -antistoffer brukes til å påvise tilstedeværelsen av proteinet aktin. Den brukes kun i forbindelse med biologisk eller medisinsk forskning , eller i diagnostisk patologi laboratorier. Actin er studert det meste av forskere som undersøker muskel eller andre tilhørende systemer , som for eksempel cytokinese eller bindende proteiner . Men fordi det er den mest tallrike protein i eukaryote celler --- mer komplekse celletyper som inneholder interne strukturer som kalles organeller --- det er ofte brukt som en positiv kontroll for eksperimenter fokusert på andre typer proteiner . Actin

protein aktin er veldig strengt , eller " høyt ", konservert gjennom ulike organismer , fra alger og bakterier til hunder og mennesker . Det eksisterer som ett protein enheter, eller monomerer , som må slås sammen for å danne større , globular protein . Aktin er nødvendig å gjøre filamentene i celler for cellenes bevegelse , så vel som for bevegelse av organ inne i cellen . Det er derfor viktig for grunnleggende cellulære prosesser, for eksempel motilitet og celledeling .
Områder i forskning ved hjelp Actin Antistoffer

Actin antistoffer er er blant de mest rutinemessig og allment brukte cellebiologiske verktøy. Deres søknad til eksperimenter ved hjelp av immunhistokjemi , western blotting , immunoprecipitation , ELISA og flowcytometri , har en lang , veldokumentert historie om suksess . De fleste selskaper som produserer og selger antistoffer for forskningsformål produsere primære antistoffer som kan knyttes til en farget eller fluorescerende molekyl , eller som må anerkjennes av en sekundær antistoff knyttet til ett av disse synlige molekyler .

Actin antistoffet i Immunhistokjemi og Immunnocytochemistry

Actin er en viktig del av cellens messenger ribonucleic produksjon , så det er vanligvis til stede i store mengder i kjernen . Dens nærvær her kan anvendes som en positiv kontroll for IHC -eller ICC eksperimenter. Actin er oppdaget ved hjelp antistoffer som gjenkjenner dens enkelte aminosyrer . Den visuelle observasjon at aktin antistoffer er oppdaget beviser at protokollen som brukes er riktig utført eller formulert . Farging med aktin antistoffer fungerer som en positiv kontroll for andre antistoffarging å oppdage andre typer proteiner , enten for forskning eller medisinske diagnoser .
Actin antistoffet i Western Blotting

Western blotting er en metode for påvisning og kvantifisering av protein ved hjelp av vitenskapelige fremgangsmåter, såsom gel -elektroforese , immunoblotting , og antistoff -hybridisering . Proteinet av interesse og aktin protein blir electrophoresced gjennom en gel, noe som gjør at proteiner av forskjellige størrelser for å skille langs en størrelse gradient . De enkelte proteiner overføres deretter til en spesiell membran , hvor de blir immobilisert . Actin -antistoffer anvendes til membranen for å detektere den immobiliserte aktin protein , igjen tjener som en positiv kontroll for påvisning av proteinet av interesse . Fordi en kjent masse av aktin protein er vanligvis brukes , er det mulig å sammenligne dette tallet til den av protein av interesse og dermed bestemme sin kvantitet.
Actin antistoffet i immunoprecipitation

Igjen, på grunn aktin -antistoffer så som rutinemessig brukes og godt studert , deres enestående evne til å binde seg strengt til aktin og deres kjent størrelse egenskapen utnyttes som positive kontroller i immunoprecipitation eksperimenter. Interaksjoner som forekommer i en celle kan bli studert ved lysering av cellen --- tilrettelegge dens desintegrering --- og oppsamling av det resulterende lysat , som er i det vesentlige en "suppe" av forskjellige proteiner . Ved å binde antistoffer mot et protein av interesse og aktin , og deretter påføre blandingen på en kolonne, er det mulig å rense antistoff -bundet protein -og antistoff -bundet aktin fra andre uønskede proteiner. Påvisning av aktin proteiner ved aktin antistoff fungerer som bevis på at immunoprecipitation prosedyren var vellykket .