Protokoller for Hoechst Farging

Hoechst flekker er fluorescerende fargestoffer som brukes for merking DNA og RNA gjennom fluorescens mikroskopi og flowcytometri teknikker . Hoechst 33258 og Hoechst 33342 er den mest brukte av disse flekkene . De har evnen til å binde seg til DNA-molekyler , noe som fører kjernene og mitokondrier skal vises fluorescerende under ultrafiolett lys . Protokoller for Hoechst flekker er vanlig praksis i bioteknologiske og genetikk laboratorier , og inkluderer cellefarging teknikker ved hjelp av både Hoechst 33258 og Hoechst 33342 . Hoechst 33342 HSC Farging og stamcelle Rensing Protocol

Denne protokollen brukes til å farge celler fra mus benmargen . Teknikere forberede benmargsprøvemed HBSS + salt -løsning , HEPES -buffer -og kalvefosterserum . De spinner løsningen og legge til en forvarmet DMEM medium . Hoechst flekken blir deretter tilsatt. Oppløsningen ble plassert i en 98,6 grader Fahrenheit vannbad i nøyaktig 90 minutter , rapporterer Department of Immunology ved University of Pittsburgh. DNA- segmenter vises fluorescerende under en cytometer .
Hoechst 33342 DNA Farging

løpet av denne protokollen , teknikere suspendert Hoechst 33342 flekken i destillert vann, tilsett 2 prosent kalvefostersetum til celleprøve, mens pH ble holdt på 7,2 ved hjelp av en buffer -løsning. Cellene blir deretter inkuberes ved 98,6 grader F for en time , og umiddelbart analysert med en utrustning kalt cytometer .

Stained DNA er så synlig og fluoriserende , ifølge University of Michigan Health System .


DNA Detection Bruke DNA - bindende fluorokrom Hoechst 33258

Denne protokoller brukt en del av utstyret som heter spektrofotometer å analysere DNA og RNA segmenter . Teknikere bruker Hoechst 33258 arbeidsløsning og kalv thymus DNA-prøver . De gjør også en adskilt løsning ved hjelp av DNA-prøve og en kjemisk kalt etidiumbromid . Senere , de sammenligner cellefarging resultater både i media , ved hjelp av et spektrofotometer , ifølge Dagens Protokoller i Cytometry .