Hvordan varierer mengden BAPNA-fordøyelse med tiden?

Fordøyelsen av BAPNA (Benzoyl-DL-arginine-p-nitroanilid) av trypsin følger typisk Michaelis-Menten enzymkinetikk. Fordøyelseshastigheten øker først med tiden ettersom flere enzymmolekyler blir engasjert i reaksjonen. Men ettersom substratkonsentrasjonen avtar over tid, avtar fordøyelseshastigheten. Forholdet mellom mengden BAPNA fordøyd og tid kan beskrives ved følgende ligning:

[BAPNA]t =[BAPNA]0 - k[E][BAPNA]0*t

Hvor:

- [BAPNA]t:Mengde BAPNA fordøyd på tidspunkt t

- [BAPNA]0:Startkonsentrasjon av BAPNA

- k:Hastighetskonstant for reaksjonen

- [E]:Konsentrasjon av trypsin

- t:Tid

Plottet av [BAPNA]t mot t viser typisk en hyperbolsk kurve. Den innledende lineære fasen av kurven representerer perioden når reaksjonshastigheten er konstant og proporsjonal med enzymkonsentrasjonen. Etter hvert som reaksjonen skrider frem, flater kurven ut på grunn av uttømming av substratet og den avtagende fordøyelseshastigheten.

Ved å måle reaksjonens starthastighet (Vo) og bestemme Michaelis-Menten-konstanten (Km) gjennom grafisk analyse (f.eks. Lineweaver-Burk eller Hanes-Woolf plott), er det mulig å karakterisere enzymkinetikken og få innsikt i katalytikken effektivitet og substrataffinitet til trypsin for BAPNA.